Лабораторная диагностика гепатита В
Инкубационный период вируса гепатита B (ВГB) составляет до 180 дней, в среднем – 90 дней, может выявляться в крови у пациентов с острой формой заболевания за 2-8 недель до клинических проявлений заболевания. При хронической форме заболевания период циркуляции вируса гепатита B в крови неограничен.
Перенесенное в острой клинической форме заболевание ВГB приводит к формированию стойкого иммунитета. Защитную функцию выполняют антитела к HBsAg (далее – анти-HBs), которые появляются через 2-6 недель после заражения и сохраняются в течение всей жизни.
Лабораторная диагностика гепатита В основана на выявлении специфических для гепатита В антигенов и соответствующих антител в крови, а также вирусных нуклеиновых кислот, основными из которых являются:
- НВsAg - анти-НВs
- анти-НВс класса IgМ и IgG
- НВеAg - анти-НВе
- ДНК ВГВ
Определение HBsAg осуществляется методами ИФА, ИХА а также мембранным экспресс-методом.
Антитела к HBsAg являются маркером, свидетельствующим о ранее перенесенной инфекции либо о наличии поствакцинального иммунитета.
В случаях первичного обнаружения HBsAg, анти-HBsAg необходимо проведение конфирматорного теста. Первично-положительные по HBeAg результаты исследования подтверждаются конфирматорным тестом.
HBeAg представляет собой диагностический маркер, ассоциированный с высокой инфекционностью крови, активной репродукцией вируса гепатита В и риском перинатальной передачи возбудителя. Выявление антител к HBeAg свидетельствует о завершении активной репродукции вирусных частиц и начале стадии реконвалесценции, за исключением мутантных форм вируса. Наличие HBcAg в гепатоцитах свидетельствует об активной репродукции вирусных частиц.
Антитела к HBcAg класса M (далее – анти-НВс IgM) появляются через 1-2 недели после появления HBsAg и циркулируют в крови от 2 до 18 месяцев у пациентов с острым вирусным гепатитом B и у пациентов с хроническим вирусным гепатитом B (при реактивации инфекции).
Качественное определение ДНК вируса гепатита B методом ПЦР указывает на наличие и репродукцию в организме возбудителя.
Количественное обнаружение ДНК вируса гепатита B методом ПЦР (определение вирусной нагрузки) позволяет оценить активность репликации вируса и эффективность противовирусной терапии. Метод ПЦР используется также для определения генотипов вируса гепатита B с целью выбора оптимальной схемы лечения заболевания.
Забор крови для серологических исследований проводится с соблюдением правил асептики и антисептики в вакутайнеры или сухие центрифужные пробирки. В течение 24 часов с момента взятия образца крови он должен быть подвержен обработке с целью получения надосадочного слоя сыворотки крови, используемого для проведения дальнейших лабораторных исследований.
Кратковременное хранение сыворотки крови (до 3 суток) допускается при температуре от +
Забор крови для исследований методом ПЦР осуществляется путем взятия венозной крови с соблюдением правил асептики и антисептики в сухие центрифужные пробирки или в пробирки с антикоагулянтом (калиевая или натриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты).
Не допускается использование гепарина в качестве антикоагулянта ввиду его ингибирующего воздействия на амплификацию генов.
Врач серологического отдела
ЦДЛ городской больницы
Макас Е.Н.
